Question

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Explanation:

Identificar la información faltante

Para completar esta tabla de manera precisa, se requiere la secuencia de nucleótidos o el mapa de restricción del plásmido y del ADN celular (inserto), los cuales se muestran parcialmente cortados en la parte superior de la imagen (columnas numeradas 1, 2 y 3 con pares de bases como GC, AT, CG). Sin embargo, la imagen está incompleta y no proporciona las secuencias completas ni las dianas de reconocimiento específicas para las enzimas de restricción mencionadas (EcoRI, HindIII, BamHI, XmaI).

Explicar el criterio de selección de enzimas

En la tecnología de ADN recombinante, para clonar un fragmento de ADN celular en un plásmido vector, se deben seguir ciertas reglas generales para elegir la enzima de restricción adecuada:

1. Dianas en el plásmido: La enzima ideal debe cortar el plásmido exactamente una vez (en el sitio de clonación múltiple) para abrir el vector sin fragmentarlo. Si corta cero veces, el plásmido no se abre. Si corta más de una vez, el plásmido se rompe en múltiples pedazos.
2. Dianas en el ADN celular (inserto): La enzima debe cortar a ambos lados del gen de interés para liberarlo, pero no debe cortar dentro de la secuencia del gen, ya que lo destruiría e inactivaría.

Formular una respuesta condicional

Dado que los datos numéricos exactos de los sitios de corte están fuera del encuadre, explicaremos detalladamente cómo completar cada columna de la tabla basándonos en estos principios biológicos fundamentales.

Answer:

La imagen provista está incompleta, ya que las secuencias de ADN necesarias para contar los sitios de corte de cada enzima de restricción (EcoRI, HindIII, BamHI, XmaI) se encuentran cortadas en la parte superior.

Para completar la tabla cuando dispongas de las secuencias completas, debes aplicar los siguientes criterios de la tecnología de ADN recombinante:

1. Número de sitios en el Plásmido: Cuenta cuántas veces aparece la secuencia de reconocimiento de cada enzima en el plásmido.

• Idealmente: Buscas una enzima que corte exactamente 1 vez en el plásmido (en el sitio de clonación múltiple) para abrirlo sin fragmentarlo.

1. Número de sitios en el ADN celular: Cuenta cuántas veces corta cada enzima en el fragmento que contiene el gen de interés.

• Idealmente: Buscas una enzima que corte 2 veces (una a cada lado del gen para liberarlo) y 0 veces dentro del gen para no dañarlo.

1. ¿Utilizó la enzima? (Sí / No):

• Sí: Si la enzima corta el plásmido una sola vez y permite aislar el gen intacto del ADN celular con extremos compatibles (cohesivos o romos).
• No: Si la enzima corta el plásmido más de una vez (lo destruye), no lo corta (no se abre), o si corta dentro del gen de interés (lo inactiva).

1. Razones para su uso o no uso:

• Ejemplo de uso: "Se utiliza porque corta el plásmido una sola vez para abrirlo y flanquea el gen de interés en el ADN celular sin cortarlo internamente."
• Ejemplo de no uso: "No se utiliza porque corta el plásmido en múltiples sitios" o "No se utiliza porque cortaría y destruiría el gen de interés."